1. 目的：本規程旨在為無(wú)菌操作及無(wú)菌室的維護提供一個(gè)標準化規程。 2. 范圍：微生物檢測實(shí)驗室。
3. 職責：實(shí)驗室工程師、實(shí)驗室技術(shù)員對實(shí)施負責。 4. 內容：
4.1 無(wú)菌室應設有無(wú)菌操作間，無(wú)菌操作間潔凈度應達到10000級維持在20-24℃，濕度保持在45-60%。
超凈工作臺潔凈度應達到100級。
4.2 無(wú)菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。 4.3 嚴防一切滅菌器材和培養基污染，已污染者應停止使用。 4.4 無(wú)菌室應備有工作濃度的消毒液，如75%酒精、5%84消毒液等。
4.5無(wú)菌室應定期用干凈的布進(jìn)行清洗且用適宜的消毒液及紫外燈滅菌清潔并開(kāi)啟空氣自?xún)艋到y，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。
4.6 需要帶入無(wú)菌室使用的儀器，器械，培養皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。 4.7 工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或者消毒液洗手消毒，然后再更衣室更換專(zhuān)用干凈的工作服、鞋子、帽子、口罩和手套（或用75%酒精再次擦拭雙手），在經(jīng)過(guò)
風(fēng)淋室的吹掃，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。
4.8 無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照1h以上，并且同時(shí)打開(kāi)
超凈工作臺進(jìn)行吹風(fēng)。實(shí)驗操作完畢，應及時(shí)清理無(wú)菌室，收拾清洗并且消毒
超凈工作臺。再用紫外燈輻照滅菌1h以上。
4.9 供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開(kāi)啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。 4.10 每次操作過(guò)程中，均應做陰性對照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。 4.11 吸取菌液時(shí)，必須用洗耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
4.12 接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。
4.13 帶有菌液的吸管、試管、培養皿、錐形瓶等器皿應于立式滅菌鍋（121℃ ，45min）高溫高壓滅菌，待到立式滅菌鍋壓力降為0，方可取出沖洗，晾干。帶有菌液的霧化器等不宜用高溫高壓滅菌的應浸泡在盛有5%84消毒液的消毒桶內消毒，24小時(shí)后取出沖洗。
4.14 如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%84消毒溶液或75%酒精傾覆在被污染處**少30分鐘，再做處理。工作服、帽子、鞋子等受到菌液污染時(shí)，應立即脫去，置于立式滅菌鍋（121℃ ，45min）高溫高壓滅菌后洗滌，晾干，再紫外燈輻照殺菌。
4.14 凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒滅菌后，才可在水龍頭下沖洗，嚴禁未消毒滅菌的物品隨意丟棄或者排放。
4.15 無(wú)菌室應每月檢查菌落數。在超凈工作臺開(kāi)啟的狀態(tài)下，取內徑為90mm的無(wú)菌培養皿若干，無(wú)菌操作下分別注入融化并冷卻約45℃的營(yíng)養瓊脂培養基約25-30ml，放**凝固后，倒置于36±1℃的恒溫培養箱里培養24-48h，證明無(wú)菌后，取無(wú)菌平板3～5個(gè)，分別放置工作位置的左中右等處，開(kāi)蓋暴露30min后，倒置于36±1℃的恒溫培養箱里培養24-48h，取出檢查。10000級潔凈室平均不超過(guò)3個(gè)菌落。如超過(guò)限度，應對無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒，直**重復檢查合格為止。
5.安全注意事項：嚴格無(wú)菌操作，防止微生物污染；操作人員進(jìn)入無(wú)菌室前應先關(guān)掉紫外燈。 6.參照文獻
《藥品衛生檢驗方法》
《中G藥品檢驗標準操作規范》中 (無(wú)菌檢查法)章節
中華人民共和G醫藥行業(yè)標準 YY/T0188.6-1995《藥品檢驗操作規程》
