過(guò)濾除菌操作答疑

問(wèn)：**近要做一些培養基，有一些糖類(lèi)需要過(guò)濾除菌，但不知道怎么操作，還需要什么輔助設備？

答：你只要有濾膜和配套的過(guò)濾器就可以了，一般在超凈工作臺上進(jìn)行。濾膜用0.22微米或0.45微米兩種規格，指的是濾膜的孔徑大小吧。一般0.22就夠了！

答：如果溶液的量比較大，超過(guò)500ml，可以采用已滅菌的抽濾瓶，預先墊好0.22um 的濾膜。抽濾瓶滅菌前要檢查封口用紗布或棉花堵牢，使用時(shí)，不用在無(wú)菌室中進(jìn)行，只要保證收集瓶無(wú)菌狀態(tài)就可以。抽濾后，過(guò)濾好的溶液在無(wú)菌條件下倒進(jìn)已滅菌的空試劑瓶中。

如果用小量的溶液過(guò)濾，無(wú)菌室內用一次性注射器和一次性0.22um濾膜（millipore或pall都有賣(mài)）就可以。

答：看過(guò)濾的量，如果量小，用注射器加濾器、0.22微米濾膜過(guò)濾，濾器加上濾膜后蓋緊，稍旋松，飯盒密封100度蒸餾水煮沸30分鐘滅菌，用來(lái)承接無(wú)菌糖水的瓶需高壓。用時(shí)在無(wú)菌操作臺上操作，并先旋緊濾器，注意濾器外流下去的哪怕一滴也會(huì )造成染菌；過(guò)濾應該是費力的，如果感覺(jué)很輕松，則濾膜已破。0.45微米的濾膜一般用于兩次過(guò)濾的**次，以防止0.22堵塞。注射器，若能高壓更好些。

如果量大，正壓可用蠕動(dòng)泵接皮管接不銹鋼濾器大張濾膜，這些都是要高壓的。負壓可用抽濾。